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技術(shù)文章
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技術(shù)文章
2019-1022
原代細胞培養(yǎng)中常遇到的誤區(qū)原代細胞（primaryculturecell）是指從機體取出后立即培養(yǎng)的細胞。有人把培養(yǎng)的第1代細胞與傳10代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫(yī)學基礎(chǔ)研究，如蛋白質(zhì)組學、基因組學、細胞株（系）研究、DNA，RNA和遺傳學研究等，還可應用于當今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。原代細胞在生物醫(yī)藥領(lǐng)域有不可替代性作用，市場前景廣闊。原代細胞的培養(yǎng)是指直接從機體取下細胞、組織和器...
查看更多2019-1021
一、形態(tài)學鑒定1.在倒置顯微鏡中直接觀察活細胞的形態(tài)學特征2.細胞染色檢查：a)將無菌玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，加細胞懸液后培養(yǎng)；b)待細胞長滿玻片后取出，用PBS清洗，之后放于載玻片上，待其自然干燥；c)用PBS/甲醇（1:1）固定15分鐘；d)棄固定液，加合適的染色液染色；e)染色完畢后用清水洗凈，置于空氣中干燥，f)干燥后，用二甲苯透明，光學樹脂封片后觀察。二、免疫組織細胞化學鑒定1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片；2.PBS清洗標本3...
查看更多2019-1018
一、貼壁細胞的消化法傳代1、吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或與EDTA混合液）輕輕搖動培養(yǎng)瓶，使瓶底細胞都浸入溶液中。3、消化2-5分鐘后把培養(yǎng)瓶放置在顯微鏡下進行觀察，發(fā)現(xiàn)原貼壁的細胞逐漸趨于圓形，在還未漂起時，棄去消化液，加入培養(yǎng)液終止消化。4、用吸管將貼壁的細胞吹打成懸液，分別接種到另外兩到三個培養(yǎng)瓶中，置37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。第二天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細胞的傳代1、直接傳代①讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3。②用...
查看更多2019-1017
細胞凍存技術(shù)實驗室低溫保存設(shè)備包括：液氮保存箱、液氮罐、-140℃/-150℃深冷低溫保存箱、-86℃超低溫冰箱、程控降溫儀、低溫冰箱（-20℃、-30℃、-40℃）、藥品保存箱、疫苗保存箱、血庫冰箱、層析柜、防爆冰箱、防火冰箱等。檢驗冰箱可靠性和制冷能力的方法：1、常規(guī)冰箱放置溫度計；2、超低溫冰箱放置加熱器、大量樣品或反復開門1.凍存保護劑很多化合物都可以作為凍存保護劑，它們既可以單獨使用也可以聯(lián)合使用，例如糖、血清和去污劑。雖然凍存沒有的準則，但是大家普遍認為二甲基亞砜...
查看更多2019-1016
凡是混入細胞培養(yǎng)環(huán)境中對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物都可視為污染。細胞污染可分為三大類：微生物污染、細胞間交互污染和化學污染。微生物污染：包括真菌、細菌、支原體和病毒污染。細胞間交互污染：指的是非同種的其他細胞污染化學污染：指影響細胞生存的非細胞所需的化學成分。一、微生物污染細菌和真菌污染是較容易發(fā)現(xiàn)的，而病毒、支原體和其他細胞系的污染是不容易被察覺的。1.細菌污染時培養(yǎng)液pH值改變，溶液變渾濁。細菌的大量增殖導致細胞液中營養(yǎng)大量消耗，并產(chǎn)生毒素抑制細胞的生長，終導...
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