ProFlex 2x96 PCR操作指南

    ProFlex2×96PCR儀是一臺(tái)擁有兩個(gè)獨(dú)立96孔模塊的PCR系統(tǒng)。它能實(shí)現(xiàn)兩臺(tái)儀器的工作效率，操作的核心在于理解每個(gè)模塊的獨(dú)立性。以下操作指南將幫你快速上手，掌握雙模塊并行的技巧。

一、開機(jī)與界面導(dǎo)覽

    開機(jī)自檢：接通電源，按下前面板的電源開關(guān)，儀器啟動(dòng)并執(zhí)行自檢。

    主界面布局：觸摸屏亮起后，主界面會(huì)清晰地顯示模塊A和模塊B的狀態(tài)。每個(gè)模塊都有獨(dú)立的控制圖標(biāo)和狀態(tài)顯示，這是進(jìn)行所有操作的入口。

二、創(chuàng)建與設(shè)置PCR程序

    ProFlex2×96允許為兩個(gè)模塊設(shè)置獨(dú)立的程序。

    1.進(jìn)入編輯模式

    觸摸屏上點(diǎn)擊你想要設(shè)置的模塊（例如模塊A），進(jìn)入該模塊的操作界面，然后選擇“新建"或“編輯"程序。

    2.設(shè)置溫度步驟與循環(huán)

    程序編輯界面以表格形式展示，每一行代表一個(gè)步驟。點(diǎn)擊溫度或時(shí)間數(shù)值即可修改。

    一個(gè)典型的PCR程序包含：

    預(yù)變性：95°C，5分鐘。

    循環(huán)步驟：95°C變性30秒→55°C退火30秒→72°C延伸30秒，此循環(huán)進(jìn)行30-35次。

    終延伸：72°C，5分鐘。

    低溫保持：4°C或10°C。

    如何添加循環(huán)？

    在編輯界面點(diǎn)擊“添加循環(huán)"，設(shè)定循環(huán)數(shù)（如30），然后將變性、退火、延伸三個(gè)步驟拖入循環(huán)體內(nèi)。

    3.為模塊B設(shè)置程序

    返回主界面，點(diǎn)擊模塊B的圖標(biāo)，重復(fù)上述步驟，為其設(shè)置相同或不同的程序。

    應(yīng)用技巧：你可以為模塊A設(shè)置常規(guī)擴(kuò)增程序，同時(shí)為模塊B設(shè)置梯度優(yōu)化程序，實(shí)現(xiàn)“一機(jī)兩用"。

三、運(yùn)行梯度功能（快速優(yōu)化退火溫度）

    每個(gè)96孔模塊都支持獨(dú)立的3區(qū)梯度，這是優(yōu)化新引物退火溫度的重要工具。

    在某個(gè)模塊的程序編輯界面，找到并選中退火步驟。

    點(diǎn)擊界面上的“梯度"或“Gradient"選項(xiàng)。

    設(shè)置期望的中間溫度（如55°C），儀器會(huì)自動(dòng)將96孔板分為上、中、下三個(gè)區(qū)域，分別設(shè)定不同的溫度（如53°C,55°C,57°C）。溫度差異可調(diào)。

    保存程序并運(yùn)行，一次實(shí)驗(yàn)即可找到理想的退火溫度。

四、裝載樣品與啟動(dòng)運(yùn)行

    裝載樣品：打開儀器熱蓋，將配制好反應(yīng)液的0.1mL或0.2mLPCR管、8聯(lián)管或96孔板，平穩(wěn)放入對(duì)應(yīng)的模塊中。

    關(guān)閉熱蓋并鎖定：分別壓下每個(gè)模塊的熱蓋，確保聽到鎖扣閉合的“咔嗒"聲。熱蓋未鎖緊，模塊將不會(huì)啟動(dòng)加熱。

    啟動(dòng)運(yùn)行：返回主界面，確認(rèn)兩個(gè)模塊的程序設(shè)置無誤后，可分別或統(tǒng)一點(diǎn)擊“開始"按鈕啟動(dòng)。儀器會(huì)先加熱熱蓋，再進(jìn)入預(yù)設(shè)程序。

    運(yùn)行監(jiān)控：運(yùn)行中，觸摸屏可隨時(shí)切換查看兩個(gè)模塊的實(shí)時(shí)溫度、剩余時(shí)間和循環(huán)進(jìn)度。ProFlex2×96也支持通過ThermoFisherConnect進(jìn)行遠(yuǎn)程監(jiān)控。

五、實(shí)驗(yàn)結(jié)束與日常維護(hù)

    結(jié)束與取樣：程序運(yùn)行結(jié)束后，儀器自動(dòng)降至4°C或室溫保持。打開熱蓋，小心取出樣品。注意熱蓋和模塊表面可能有余溫。

    數(shù)據(jù)保存：可在屏幕上查看運(yùn)行記錄，或通過USB導(dǎo)出實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

    清潔與保養(yǎng)：

    每次使用后：用無塵布蘸取少量70%乙醇，輕輕擦拭模塊孔內(nèi)壁和熱蓋內(nèi)側(cè)，去除冷凝水和殘留物。

    定期檢查：每月檢查一次熱蓋密封圈是否完好。

    年度校準(zhǔn)：建議每年進(jìn)行一次溫度驗(yàn)證，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

總結(jié)

    掌握ProFlex2×96PCR儀的操作，關(guān)鍵在于理解其雙模塊獨(dú)立運(yùn)行和單模塊梯度優(yōu)化的能力。通過為兩個(gè)模塊分別設(shè)置程序，你可以利用這臺(tái)儀器，高效完成常規(guī)擴(kuò)增與條件優(yōu)化的并行實(shí)驗(yàn)。

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