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新型二代羊水培養(yǎng)基的檢驗方法

更新時間：2020-08-27點擊次數(shù)：2181
新型二代羊水培養(yǎng)基的檢驗方法：

采用如下方法做羊水細胞原位培養(yǎng)或按其它常規(guī)羊水細胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)羊水細胞：

1、取羊水20ml， 以120xg離心十分鐘。

2、在無菌操作臺操作，棄上清液。

3、加入2ml羊水培養(yǎng)基，輕輕 混勻，制成細胞懸液。

4、取35mm培養(yǎng)皿，在蓋子上面及下半部側壁都做好標記（包括編號、姓名、日期等）。

5、滴加0.5ml細胞懸液至培養(yǎng)皿中的蓋玻片（25px2）中央，用移液管尖小心攤開。注意液體不能流出蓋玻片。

6、將培養(yǎng)皿置于5% CO2、濕度飽和的37度培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。

7、24小時后，給每塊蓋玻片補加1.5ml培養(yǎng)基。

8、接種7天后觀察細胞。當發(fā)現(xiàn)蓋玻片上細胞克隆數(shù)大于10個，每個克隆細胞數(shù)大于300且克隆邊沿細胞呈旺盛分裂狀態(tài)時，即可收獲細胞。否則，繼續(xù)培養(yǎng)1~2天。當克隆邊沿細胞融合度大于90%，呈現(xiàn)停止分裂狀態(tài)時，意味細胞已經老化，不適合用作分析。

9、適合收獲的細胞按常規(guī)方法使細胞分裂停止在有絲分裂中期并制作細胞片，經吉姆薩染色處理后做染色體核型分析。

上一個：細胞治療中的細胞計數(shù)標準

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